網站首頁技術中心 > 土黴素試劑盒檢測(組織☁✘╃☁、牛奶☁✘╃☁、飼料☁✘╃☁、蜂蜜)
產品目錄
土黴素試劑盒檢測(組織☁✘╃☁、牛奶☁✘╃☁、飼料☁✘╃☁、蜂蜜)
釋出時間☁☁:2022-09-14 點選量☁☁:78

土黴素酶聯免疫試劑盒說明書

一☁✘╃☁、藥物概述及檢測原理

 歐盟第675/92號令中初步規定在肌肉及牛奶中的四環素族化合物的總量不得超過100ppb₪▩╃,在腎臟₪▩╃,肝臟及雞蛋中分別不得超過600 ppb₪▩╃,300 ppb200ppb↟••。

本公司的土黴素酶聯免疫試劑盒使用全新一代生物技術開發₪▩╃,具有方便☁✘╃☁、快速☁✘╃☁、靈敏等特點↟••。

本試劑盒利用土黴素抗體與土黴素可產生特異性結合的性質₪▩╃,先在酶標板上預包被抗原₪▩╃,再加入標準品(樣本)和土黴素抗體₪▩╃,樣本土黴素藥物與固定在酶標板上的抗原競爭土黴素抗體₪▩╃,最後加入底物催化顯色↟••。此時顯色深度與標準品(樣本)中土黴素藥物的含量成反比↟••。

 

二☁✘╃☁、試劑盒內包含組分☁☁:

10×標準品濃縮液☁☁:0 ppb☁✘╃☁、4ppb☁✘╃☁、12 ppb☁✘╃☁、36 ppb☁✘╃☁、108 ppb₪▩╃,0.5mL/瓶↟••。

96孔酶標板☁☁:1

土黴素抗體工作液☁☁:1瓶(7mL/瓶)

酶標二抗工作液☁☁:1瓶(7mL/瓶)

20×濃縮洗滌液☁☁:1瓶(30 mL/瓶)

20×濃縮復溶液☁☁:1瓶(10 mL/瓶)

底物A液☁☁:1瓶(7 mL/瓶)

底物B液☁☁:1瓶(7 mL/瓶)

終止液☁☁:1瓶(7mL

說明書

蓋板膜

三☁✘╃☁、使用者需要自備的裝置和試劑

儀器☁☁:

酶標儀(檢測波長450 nm☁✘╃☁、630 nm

電子天平(精度☁☁:0.01 g

離心機(4000 g及以上)

生化培養箱(可調25℃☁✘╃☁、37℃☁✘╃☁、60℃)

旋渦振盪器

微量移液器☁☁:(20μl-200μl☁✘╃☁、100μl-1000μl各一支☁✘╃☁、30-300ul八道排槍)

計時器

試劑☁☁:(試劑均為分析純

去離子水

 

四☁✘╃☁、試劑盒特異性

   試劑盒與其他藥物的交叉反應率☁☁:

土黴素…………………………100%

金黴素…………………………240%

四環素…………………………200%

強力黴素(多西環素)……………………20%

 

五☁✘╃☁、樣本檢測步驟

1. 工作液準備

復溶工作液☁☁:取120×濃縮復溶液加去離子水19份按照1:19的比例稀釋即得↟••。

洗滌工作液☁☁:120×濃縮洗滌液加去離子水19份按照1:19的比例稀釋即得↟••。

1 M鹽酸溶液☁☁:量取1ml濃鹽酸加去離子水11ml溶解混勻即得↟••。

2. 樣品前處理

組織樣本(稀釋倍數☁☁:12

Ø 準確稱取1±0.01 g均質後的組織樣品於10 mL離心管中;

Ø 加入5 mL去離子水₪▩╃,劇烈渦動2min

Ø 4000 g以上₪▩╃,離心10 min

Ø 500ul上清液加入500ul復溶工作液(見5.1)中₪▩╃,渦動10min

Ø 50ul進行檢測↟••。

蜂蜜樣本(稀釋倍數☁☁:10

Ø 精確稱取1±0.01g蜂蜜樣品於10mL離心管中;

Ø 加入2mL去離子水₪▩╃,充分渦動1 min溶解分散;

Ø 100ul溶解液加入400ul復溶工作液中₪▩╃,渦動1 0S混勻;

Ø 立即取50ul進行檢測↟••。

液態奶樣本方法一(稀釋倍數☁☁:10)(同卡那黴素液態奶方法一致)

Ø 取樣好的液態奶樣本解凍後於室溫靜置平衡30min以上;

Ø 將槍頭伸入原奶樣本下層₪▩╃,小心取出1ml樣本加入2ml離心管中(注意☁☁:儘量不要取到上層的奶油);

Ø 加入50μL 1M鹽酸(見5.1)₪▩╃,強烈震搖1min (或使用渦動儀渦動30s);

Ø 使用離心機室溫4000 g以上離心10 min

Ø 取上層清亮液體50μL加入另一干淨離心管中(注意☁☁:儘量不要取到最上層的奶油)₪▩╃,再加入450μL復溶工作液₪▩╃,強烈震搖1min (或使用渦動儀渦動30s);

Ø 50 μL液體進行分析↟••。

液態奶樣本方法二(稀釋倍數☁☁:40)(同卡那黴素液態奶方法一致)

Ø 精確量取50ul液態奶樣品於1950ul復溶工作液中;

Ø 充分渦動1 min混勻;

Ø 立即取50ul進行檢測↟••。

飼料(牛飼料☁✘╃☁、豬飼料)(稀釋係數☁☁:200

Ø 準確稱取 1±0.01 g 飼料樣品於 50mL 離心管中;

Ø 加入 5 mL 去離子水₪▩╃,充分渦動 2min 至飼料完全分散;

Ø 4000 g 以上₪▩╃,離心 10 min

Ø 40 μL上清液於新的離心管中₪▩╃,加入1560μL 復溶工作液 ₪▩╃,充分渦動 30 s

Ø 立即取 50μL 進行檢測↟••。

3. 檢測

Ø 準備☁☁:將要使用的酶標板條插入酶標板架上₪▩╃,並記錄各標準品和樣品的位置₪▩╃,為減小檢測值波動建議做雙孔平行實驗(每個樣本/標準品點兩孔)₪▩╃,未使用的酶標板條用自封袋密封后₪▩╃,保存於2-8℃環境中以防變質;

Ø 標準品工作液配製☁☁:分別取52ml離心管₪▩╃,標記為0☁✘╃☁、0.4☁✘╃☁、1.2☁✘╃☁、3.6☁✘╃☁、10.8ppb;於每個管中加入900ul復溶工作液₪▩╃,於對應管中加入100ul10×標準品濃縮液00☁✘╃☁、0.4—4☁✘╃☁、1.2—12☁✘╃☁、3.6—36☁✘╃☁、10.8—108);

Ø 加樣☁☁:向對應微孔中加入標準品工作液/樣品溶液50 μL₪▩╃,再向每孔中加入50 μL酶標二抗工作液₪▩╃,再向每孔中加入50 μL抗體工作液;

Ø 孵育☁☁:輕輕振盪酶標板10 s₪▩╃,使孔內液體充分混勻後₪▩╃,蓋好蓋板膜於25℃避光反應30 min

Ø 洗滌☁☁:取出酶標板後小心揭開蓋板膜₪▩╃,倒出板孔中液體後₪▩╃,在每孔加 250 μL洗滌工作液₪▩╃,浸泡15-30s後倒掉洗滌工作液₪▩╃,然後再加入洗滌工作液重複洗滌3~4次後₪▩╃,將酶標板倒置於吸水紙上₪▩╃,用力拍幹;

Ø 顯色☁☁:在每孔中加入100 μL 底物A和底物B的混合液(注☁☁:底物A液☁✘╃☁、底物B液必須按體積1:1充分混合₪▩╃,混合液在10 min內使用₪▩╃,切不可使用金屬容器盛裝☁✘╃☁、攪拌試劑以免底物變質失效);

Ø 孵育☁☁:輕輕振盪酶標板10 s₪▩╃,使孔內液體充分混勻後₪▩╃,蓋好蓋板膜於25℃避光反應15 min

Ø 終止☁☁:在反應後的微孔中加入終止液50μL/孔₪▩╃,底物液由藍變黃表明終止成功↟••。

Ø 讀數☁☁:終止後的酶標板應在5 min內用酶標儀讀數₪▩╃,建議使用450 nm☁✘╃☁、630 nm雙波長讀取酶標板吸光度值↟••。

4. 計算結果

Ø 設各標準品(或樣品)的吸光度平均值為B₪▩╃,零標準(濃度為0 ppb的標準品)吸光度平均值B0(B/B0)×100%為各標準品(或樣品)對應的吸光度的百分比☁☁:

Ø 使用半對數系統代入標準品對應的吸光度的百分比₪▩╃,與標準品濃度擬合出標準曲線↟••。

Ø 將待檢樣品吸光度的百分比代入擬合出的標準曲線方程中₪▩╃,即可得出樣品對應的濃度₪▩╃,最後乘以樣品相應的稀釋倍數₪▩╃,即可得出樣品中檢測物含量↟••。

 

六☁✘╃☁、試劑盒引數

Ø 試劑盒靈敏度☁☁:0.4 ppb

Ø 標準曲線範圍☁☁:0.4 ppb-10.8ppb

Ø 板內變異係數☁☁:<5%

Ø 板間變異係數☁☁:<15%

Ø B0吸光度最佳值☁☁:>0.8

Ø 回收率☁☁:90%±15%

Ø 樣品最低檢測限☁☁:

  組織……………………………約12ppb

   蜂蜜……………………………約20ppb

   液態奶樣本方法一……………約20ppb

   液態奶樣本方法二……………約40ppb

   飼料……………………………約600ppb

注☁☁:ppb=ng/mLng/g↟••。

 

七☁✘╃☁、分析限制

   本試劑盒為定量或半定量試劑盒₪▩╃,建議用於大量樣本篩查分析↟••。若檢測結果為陽性₪▩╃,建議使用儀器方法開展確證實驗(如GC/MS☁✘╃☁、LC-MS/MS等)↟••。

 

八☁✘╃☁、試劑盒貯存條件

Ø 試劑盒最佳貯存溫度為2-8℃₪▩╃,切勿凍存↟••。

Ø 未使用完的酶標板須密封儲存2-8℃的環境中↟••。

 

九☁✘╃☁、注意事項

Ø 使用試劑盒前₪▩╃,請務必仔細閱讀說明書↟••。

Ø 試劑盒使用前₪▩╃,需將盒內各組份置於實驗臺上回溫至室溫(25±2℃)(提示☁☁:約1 h)↟••。

Ø 試劑使用前需搖勻₪▩╃,混合時應避免出現氣泡↟••。

Ø 槍頭為一次性用品₪▩╃,為防止試劑交叉汙染₪▩╃,檢測過程中所用槍頭不得重複使用↟••。

Ø 請勿使用過期試劑盒₪▩╃,不同批號試劑盒中的試劑不得混用↟••。

Ø 樣品處理完畢後請立即分析₪▩╃,否則可能影響檢測結果↟••。

Ø 底物A液☁✘╃☁、底物B液均為無色透明液體₪▩╃,若在使用前已變成藍色₪▩╃,或混合後立即變藍₪▩╃,說明試劑已汙染或變質↟••。

Ø 加樣過程在保證精度的前提下一定要迅速₪▩╃,以免反應時間差對檢測結果產生影響↟••。

Ø 終止液中含有硫酸₪▩╃,若不小心濺上皮膚或衣物請立即用大量清水沖洗↟••。若不慎入眼₪▩╃,請在徹底清洗後去醫院檢查↟••。

 

2011年開始我們致力於在生命科學領域☁✘╃☁、生物醫學實驗外包及論文潤色服務₪▩╃,協助客戶各類實驗服務及論文潤色₪▩╃,是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間☁✘╃☁、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究₪▩╃,歡迎您與我們聯絡↟••。

實驗代做服務☁☁:


電話諮詢
  • 服務熱線☁☁:
  • 400-665-0203
稚嫩娇小哭叫粗大撑破,丰满老熟妇japanese50mature,国产成人精品免费午夜app,欲妇荡岳丰满少妇岳